Karakterisasi dan Kuantifikasi Isoflurane-Induced Developmental Cell Kematian apoptosis dalam Mouse Cerebral CortexLATAR BELAKANG: Mengumpulkan bukti menunjukkan bahwa isoflurane dan lainnya, sama anestesi bertindak mengerahkan efek neurotoksik pada hewan neonatal. Namun, baik identitas sel kortikal maupun tingkat hilangnya sel kortikal sekarat telah cukup ditandai. Kami melakukan penelitian ini untuk imunohistokimia mengidentifikasi sel-sel mati dan untuk mengukur fraksi sel yang mengalami kematian apoptosis dalam korteks tikus neonatal, suatu wilayah otak yang substansial terpengaruh.
METODE: littermates Tujuh-hari-tua (n = 36) secara acak ditugaskan untuk eksposur 6 jam untuk baik 1,5% isoflurane atau puasa di udara kamar. Hewan eutanasia segera setelah terkena dan bagian otak yang ganda-patri untuk diaktifkan caspase 3 dan salah satu penanda seluler berikut: Nuclei Neuronal (Neun) untuk neuron, dekarboksilase asam glutamat (GAD) 65 dan GAD67 untuk sel GABAergic, serta GFAP (dgn urat saraf glial protein asam) dan S100β untuk astrosit.
HASIL: Pada tikus 7-hari-tua, paparan isoflurane menyebabkan peningkatan luas dalam kematian sel apoptosis relatif terhadap kontrol, yang diukur dengan aktif caspase 3 immunolabeling. Analisis confocal caspase 3-berlabel sel di lapisan kortikal II dan III mengungkapkan bahwa mayoritas sel-sel neuron postmitotic, tapi beberapa astrosit. Kami kemudian dihitung isoflurane-induced apoptosis neuronal di korteks visual, daerah cedera substansial. Pada hewan kontrol unanesthetized, 0,08% ± 0,001% dari lapisan II / III neuron kortikal Neun-positif immunoreactive untuk caspase 3. Sebaliknya, tingkat apoptosis neuron Neun-positif meningkat setidaknya 11 kali lipat (ujung bawah dari interval kepercayaan 95% [CI]) menjadi 2,0% ± 0,004% neuron segera setelah terpapar isoflurane (P = 0,0017 isoflurane dibandingkan kontrol) . Pada hewan isoflurane yang diobati, 2,9% ± 0,02% dari semua neuron caspase 3-positif dalam korteks superfisial juga coexpressed GAD67, menunjukkan bahwa neuron penghambatan mungkin juga akan terpengaruh. Analisis neuron GABAergic, bagaimanapun, terbukti tak terduga kompleks. Selain menginduksi apoptosis antara beberapa neuron GAD67-immunoreactive, anestesi juga bertepatan dengan penurunan dramatis di kedua GAD67 (0,98 vs 1,84 ng / mg protein, P <0,00001, anestesi dibandingkan kontrol) dan GAD65 (2,25 ± 0,74 vs 23,03 ± 8,47 ng / mg protein, P = 0,0008, anestesi dibandingkan kontrol) tingkat protein.
KESIMPULAN: Lama paparan peningkatan kematian sel apoptosis neuronal isoflurane pada tikus 7-hari-tua, menghilangkan sekitar 2% dari neuron kortikal, yang beberapa diidentifikasi sebagai interneuron GABAergic. Selain itu, paparan isoflurane mengganggu sistem saraf penghambatan oleh downregulating enzim GAD65 pusat dan GAD67. Sebaliknya, pada usia ini, hanya sebagian kecil sel merosot diidentifikasi sebagai astrosit. Relevansi klinis dari temuan ini pada hewan masih harus ditentukan. diambil dari http://www.anesthesia-analgesia.org
